La idea de la constitución de los Grupos de Estudio sobre el tema "Proteínas de Bence Jones y Cadenas Ligeras Libres" surgió de la constatación de que

a la importancia clínico-diagnóstica de la determinación
de la Proteinuria de Bence Jones (BJP)

no se correspondía una
adecuada estandarización

de métodos, protocolos de estudio y muestras de referencia, ni del modo de informar de los resultados.

Por ello y con el ánimo de avanzar en dicha estandarización se constituyó, en Mayo de 1993, la Comisión “Forlí”, a la que se han ido añadiendo con posterioridad las demás comisiones.

En relación a la determinación de las Proteínas de Bence Jones y, de una manera más general, de las Cadenas Ligeras Libres en orina, el trabajo de los Grupos de Estudio ha pretendido:

• constatar las distintas estrategias operativas existentes, y
• evidenciar y documentar las problemáticas analíticas

para, partiendo de ello y respetando siempre las realidades y exigencias particulares, verificar la posibilidad de uniformizar, para las BJP:

• la valoración
• la interpretación del resultado
• la expresión de los resultados

En referencia a la estandarización de la determinación de las Proteínas de Bence Jones,

el primer paso y objetivo irrenunciable
es que

una muestra resulte,
“BJP-Positiva” o “BJP-Negativa”
en todos los laboratorios

prescindiendo del método o del protocolo (es decir del conjunto de métodos de primer nivel y de profundización) empleados.

La estrategia acordada y adoptada por los Grupos de Estudio se basa en:

• la comparación de las experiencias operativas de la rutina cotidiana de laboratorios reales con dimensiones, estructuras y organizaciones diversificadas
• partiendo de la verificación de las “características reales” de las técnicas y métodos utilizables en la práctica

El método de trabajo se articula en las siguientes fases:

• fase experimental, consistente en la evaluación multicéntrica de muestras con características acordadas y conocidas
• fase de información de los participantes sobre todos los resultados obtenidos y elaboración de dichos resultados
• realización de "reuniones de coordinación" bajo la forma de mesa redonda para la:

° discusión en común de los resultados del trabajo experimental efectuado
° individualización, en base al consenso, de las conclusiones y objetivos alcanzados y de las eventuales acciones correctoras a tomar tanto dentro del ámbito del propio grupo como aquellas que se estime conveniente proponer fuera
° definición del trabajo a efectuar de cara a la reunión sucesiva

El “punto de partida” ha sido verificar y definir las "características reales" de las técnicas y métodos utilizables en la práctica.

Para ello se ha estimado necesario, antes que nada, proceder a:

valorar la “sensibilidad” y la “precisión”
de cada método,
tanto intra como inter-laboratorio,

y así poder, con los suficientes elementos de juicio,

colocarlos dentro de la estrategia
de búsqueda y estudio
de las BJP

Para una primera verificación de la sensibilidad y precisión de los métodos se ha tomado el modelo elemental, pero lineal, constituido por diluciones escalares de muestras de orina con una importante BJP y sólo trazas de otras proteínas.

Un modelo de este tipo posibilita el evaluar y comparar la sensibilidad y precisión de los métodos en la evidenciación de la “anormalidad de la muestra” prescindiendo de consideraciones sobre la concentración absoluta y las características específicas de las BJP.

Desde el inicio, en 1993, los Grupos de Estudio han efectuado experimentaciones y reuniones que han posibilitado un significativo avance, por parte de los participantes, en la estandarización de la determinación de las BJP.

Es más, de las experimentaciones han emergido resultados y conclusiones interesantes, algunos realmente imprevisibles y desconcertantes por lo inesperado, al respecto de la “sensibilidad” y “precisión” reales de los métodos comerciales.

Las reflexiones de los Grupos de Estudio sobre los resultados y la metodología de trabajo han:

• confirmado la buena calidad de la estrategia y los procedimientos seguidos,
• permitido la formulación de propuestas y recomendaciones operativas,
• sugerido el continuar en el camino iniciado tanto para mejorar y completar la propuesta como para tener bajo control los resultados obtenidos,
• inducido el extender el horizonte de las experimentaciones al aplicar la misma estrategia al estudio de la proteinuria en general. El objetivo, también en este caso, es verificar y mejorar la estandarización empezando por comparar los tradicionales métodos separativos (Electroforesis, SDS, etc.) con la dosificación de algunas proteínas específicas (las llamadas “marcadoras de Proteinuria”) asistida por la informática usada para la interpretación de los resultados y la elaboración del informe.

La Comisión "Forlì", así denominada por la población en la que efectuó su primera reunión, agrupa a unos 30 laboratorios de la Emilia-Romagna y otras regiones italianas circundantes. La secretaría científica de la comisión es desempeñada por el Dr. Gualtiero Pallotti (Ospedale Pierantoni – Forlì).

Dicha primera reunión qué se organizó junto al Dr. Palloti, el 28 de Mayo de 1993 en Forlì, como respuesta a las solicitudes recibidas de distintas partes, tuvo características atípicas, intentando ser un momento de agrupación para expresar libremente dudas, problemas, opiniones, sensaciones, resultados y cualquier otra cuestión relacionada con el tema propuesto.

Desde su constitución espontánea, la comisión ha efectuado más de una docena de reuniones sobre el argumento objeto inicial de los grupos de estudio: la evaluación de los métodos para la determinación de las Cadenas Ligeras Libres (CLL) y de las Proteínas de Bence Jones (BJP) en orina.

Los primeros resultados concretos fueron publicados en Biochimica Clinica en 1995, vol. 19, n. 5, en la rúbrica "L'angolo dell'Elettroforesi" de F. Aguzzi con el título "Valutazione Multicentrica di metodi e protocolli per le Catene Leggere Libere e Proteine di Bence Jones in urine - Primi risultati". Resultados posteriores, obtenidos en experimentaciones conjuntas con otras comisiones constituidas con posterioridad, han sido presentados en distintos Meetings y Congresos de sociedades científicas; las comisiones han sido invitadas, desde la edición de 1999, a presentar sus resultados y conclusiones en los Cursos CEFAR “Las Proteínas: del Laboratorio a la Clínica”.

Las distintas reuniones posteriores a las experimentaciones han permitido a la comisión el formalizar un borrador de “Recomendaciones Operativas” , que propone algunas características de base que deberían cumplir los métodos y protocolos empleados para la determinación cualitativa y cuantitativa de las BJP. Otras conclusiones extraídas de las experimentaciones y el detalle de los resultados obtenidos se relacionan en el apartado resultados y conclusiones.

Recientemente, en sus últimas reuniones, la comisión está ampliando los horizontes de sus experimentaciones al aplicar la misma metodología al estudio de la proteinuria en general. El objetivo es, al igual que inicialmente para las CLL y las BJP, el avanzar en la estandarización del estudio de la proteinuria, procediendo a comparar los tradicionales métodos separativos (EF, SDS, etc.) con la dosificación de proteínas específicas marcadoras en orina.

En 1997 las Secciones Ligures de la SIBioC – AIPAC – SIMEL decidieron emprender conjuntamente una iniciativa análoga a la de la Comisión "Forlì", también coordinada organizativamente por NSC, y constituyeron la Comisión "Liguria", cuya secretaría científica es desempeñada por la Dra. Liliana Burlando (già Ospedale Galliera – Genova) y la Dra. Giovanna Zaninetta (Ospedale S. Martino - Genova), que agrupa a unos 14 laboratorios de la zona.

La comisión "Liguria" ha mantenido un estrecho contacto con las demás comisiones, en especial con la comisión "Forlì", que le ha llevado ha presentar conjuntamente sus resultados y conclusiones en distintos Meetings y congresos de sociedades científicas, en particular los de la SIBioC y los cursos CEFAR.

Como fruto de sus reuniones de discusión, posteriores a las experimentaciones, la comisión ha formulado sus propias “Recomendaciones Operativas”, que coinciden en sus líneas de base con el documento de la comisión "Forlì", al que complementan con dos propuestas:

• consideraciones y máscara para el informe
• propuesta de evaluación de la determinación cuantitativa

Como la Comisión “Forlì”, también la comisión "Liguria" está extendiendo sus trabajos a la evaluación de los métodos para el estudio de la proteinuria en general, con el objetivo de avanzar en su estandarización.

En el 2001 se añadieron a las comisiones “Forlì” y “Liguria” dos nuevas comisiones que agrupan, entre ambas, a unos 30 laboratorios del Lazio, la Toscana y la Umbria .

La Comisión “Lazio”, coordinada por la Dra. María Teresa Muratore (Ospedale Civile – Viterbo), efectuó su primera reunión el 10 de abril de 2001 en Vitorchiano, mientras que la Comisión “Toscana-Umbría”, cuya secretaría científica la desempeña la Dra. Enzida Piazza (Ospedale Careggi – Firenze), se constituyó el 24 de mayo de 2001.

Los resultados y conclusiones de sus experimentaciones han sido expuestos, conjuntamente con los de las comisiones “Forlì” y “Liguria”, en la edición del 2001 del Curso CEFAR (Castrocaro).

A finales del 2002, NSC impulsó en España el inicio de una experimentación multicéntrica, análoga a las efectuadas con anterioridad por las comisiones italianas, centrada a nivel experimental en dos zonas geográficas diferenciadas:

• La zona “Castilla-Madrid”, que agrupa a laboratorios del área de Madrid y de ambas Castillas
• La zona “Catalunya”, que agrupa a laboratorios de toda Catalunya

A los laboratorios de estas dos zonas se unieron algunos laboratorios de otras comunidades, especialmente interesados en participar en la iniciativa.

Para aprovechar la experiencia adquirida en Italia, que se consideró que podía constituir un buen punto de partida, se propuso a los laboratorios participantes el estudio de las mismas muestras analizadas por los grupos italianos.

El grado de participación resultó altamente satisfactorio, 25 laboratorios entre ambos grupos, y se alcanzó totalmente el objetivo propuesto, que no era otro en esta primera fase que el de despertar entre los participantes el interés en discutir e intercambiar experiencias sobre el argumento de “la determinación de las Cadenas Ligeras Libres y las Proteínas de Bence Jones”.

Aunque la experimentación fue conjunta, por razones operativas las reuniones se efectuaron por separado. El Grupo “Castilla-Madrid” se reunió en Madrid el 26 de marzo de 2003, y el Grupo “Catalunya”, al que se añadieron algunos laboratorios de otras zonas, se reunió en Barcelona el 2 de abril de 2003.

En las reuniones resultó manifiesta la necesidad de avanzar en la estandarización de los métodos empleados en el estudio de las Proteínas de Bence Jones (BJP) y, para ello, se acordó el efectuar una nueva experimentación a finales del 2003.

La segunda experimentación ha implicado a más de 40 laboratorios, puesto que ha representado la constitución de dos nuevos grupos de estudio que se han añadido a la iniciativa.

En dicha experimentación se han analizado muestras del mismo origen pero de mayor concentración, al objeto de obtener resultados que resultasen más coherentes entre las distintas metódicas (y laboratorios) que los obtenidos en la experimentación inicial.

Los resultados se expusieron en las reuniones celebradas por los distintos grupos durante 2004.